Lunes, 28 de julio de 2014
Ácido retinoico

Autor: Navarro González, Mª Carmen

[EN] Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease in the world after Alzheimer's disease. Although the factors that cause this disease are not fully described, is known to be the result of exposure to environmental risk factors and genetics. It has been described several genes whose mutations are responsible for
approximately 10% of the total cases of PD. LRRK2 (leucine-rich repeat kinase) also known as PARK8 codes for a protein called dardarina or LRRK2 whose mutations are responsible for between 5-13% of cases of familial Parkinson's disease and between 1-5% of patients sporadic Parkinson's disease. LRRK2 protein is localized in the cytoplasm
associated with membranes and contains several domains, both protein interaction (ARM, ANK, LRR and WD40) and domains with enzymatic activity (ROC-COR, MAPKKK). Due to its structure and location it is thought that dardarin is involved in neuronal cell signaling and cell morphology. Hence, the mutated protein produces neurodegeneration and apoptosis via active caspases.
The study of LRRK2 promoter fragments as separate constructs in an expression vector transfected into various cell lines, lets to analyze the regulatory regions of the promoter, ie, those sequences that bind transcription factors both to activate and to repress transcription. This approach will let us identify potential EP susceptibility regions in this gene.
Thus we have identified in the proximal promoter region a motif that acts by binding a silencer of transcription. In silico we confirmed the presence of a consensus sequence for the NRSF (Neuron-restrictive silencer factor) silencing in that area. The NRSF is a silencer of transcription factor expressed in neural tissues and represses the expression of many neuronal genes in these tissues.
Trials of expression of LRRK2 promoter constructs in A204, HeLa and SH-SY5Y point to the presence of a silencing motif
in these cell lines. Additional experiments will be required for the expression of promoter constructs in neuronal cells,
in differentiated SH-SY5Y, site directed mutagenesis experiments, testing EMSA, ChIP and silencing experiments to corroborate the role of NRSF as a negative regulator of the expression of LRRK2 and to identify its triggers. The process of differentiation of SH-SY5Y cells with retinoic acid and transfection with promoter constructs has been initiated althoughwe have not obtained conclusive results yet.

Autor: Laserna Mendieta, Emilio José

El autor ha disfrutado de una beca predoctoral de Formación de Personal Investigador (CTBPRA/2005/010) de la Generalitat Valenciana.
Este trabajo de Tesis ha sido financiado por las ayudas a los proyectos “Acciones del ácido retinoico en células de neuroblastoma: aspectos básicos y biomédicos” (SAF2003-00311), “Mecanismos
moleculares de acción del ácido retinoico en células de neuroblastoma: acciones no genómicas y regulación de micro-RNAs”
(SAF 2006-00647) y “Regulación de la diferenciación celular por ácido retinoico en células de neuroblastoma: implicación de acciones no genómicas y regulación de micro-RNAs” (SAF 2007-60780) del Ministerio de Educación y Ciencia, y por la ayuda complementaria ACOMP 06/212, de la Conselleria de Empresa, Universidad y
Ciencia de la Generalitat Valenciana.

Autor: González,T.

Objetivo: El ácido retinoico es un metabolito activo de la vitamina A que administrado en grandes cantidades tiene efecto teratógeno sobre la embriogénesis de los mamíferos. Hemos investigado los efectos de la exposición temprana de embriones de rata sobre las estructuras craneofaciales. Diseño: Cuarenta y cinco ratas Sprague-Dawley gestantes fueron tratadas con 125 mg/kg de ácido all-trans-retinoico el día 10 de gestación. Las 20 ratas controles fueron tratadas con aceite. Los fetos de ambos grupos se extrajeron el día antes de llegar a término y fueron sometidos a un estudio morfológico y otro estudio morfométrico, analizando las malformaciones craneofaciales. Resultados: Ninguno de los fetos controles presentó malformaciones. El 100% de los embriones tratados con retinoico presentaron defectos craneofaciales, incluyendo fisuras faciales, exoftalmos, malformaciones e inserción baja de los pabellones auriculares, apéndices faciales y anomalías nasales. El análisis morfométrico reveló un incremento de la distancia entre los poros nasales (p<0,01) y los globos oculares (p<0,05) en los fetos tratados con retinoico. También se encontró una reducción de la distancia lateral del maxilar (p<0,01) y la mandíbula (p<0,01). Conclusiones: Tanto el estudio morfológico como el estudio morfométrico confirman la hipótesis según la cual el ácido retinoico altera el desarrollo craneofacial cuando se administra durante un momento crítico del desarrollo embrionario. Una alteración en la migración de las células de la cresta neural craneal podría ser la razón que explicaría estas anomalías.