Jueves, 17 de abril de 2014
PCR

Autor: Villalobos de B,Luz Bettina

El queso artesanal es uno de los alimentos que tiene poca supervisión sanitaria durante su elaboración y comercialización. Como se ha visto involucrado en brotes de ETA en Venezuela, y en otros países está asociado a listeriosis, en el presente trabajo se investigó la presencia de Listeria monocytogenes en quesos frescos que se expenden en comercios públicos y municipales de Cumaná. Se analizaron 60 muestras de quesos frescos determinándose los porcentajes de NaCl y pH. El aislamiento y caracterización bioquímica de las cepas de Listeria spp se realizaron según la FDA y API Listeria y molecularmente por PCR Los valores de pH oscilaron entre 3,81 y 7,10 con un promedio de 5,87, el porcentaje de NaCl osciló entre 0,58 y 7,60, con media 2,20. Diez muestras fueron positivas por pruebas bioquímicas convencionales y API Listeria para el genero Listeria. En la confirmación por PCR, se identificaron 2 L. monocytogenes, 2 positivas para el grupo L.welshimeri- L.selligeri-L.ivanovii y 5 cepas identificadas como L. innocua y 1 L.grayi Las dos L. monocytogenes, fueron positivas para gen de la listeriolisina (hly). Los datos aportan evidencia de fallas en la elaboración de los quesos artesanales por la gran dispersión en los valores de NaCl y pH, además con este estudio se confirma que Listeria monocytogenes puede encontrarse contaminando alimentos de alto consumo en el país.

Autor: Martínez Pérez, J. M.

The diagnosis of fasciolosis is based on coprological methods from 8 weeks post infection (pi). Because of the low sensitivity of this technique, the aim of this study was to evaluate molecular and immunological techniques in faecal samples...

Autor: Tavares-Marques,Lucinda

La anaplasmosis bovina es una enfermedad causada por Anaplasma marginale (A. marginale), bacteria intraeritrocítica clasificada dentro de las α-proteobacterias. En Venezuela, 47,6% del ganado bovino se encuentra afectado por esta enfermedad, ocasionando grandes pérdidas en estos rebaños; sin embargo, se desconoce la incidencia de esta enfermedad en el ganado ovino. El objetivo de este trabajo fue estandarizar la técnica de PCR para la detección de A. marginale en muestras de sangre de bovinos y ovinos. Para esto, se utilizaron dos iniciadores Ana19A y Ana19B específicos para amplificar el gen de la proteína MSP5 de A. marginale. Con la finalidad de probar el PCR estandarizado, se analizaron muestras de sangre bovina provenientes de una zona endémica, resultando positivos el 40% de las muestras. En el caso de los ovinos, un 25% de las muestras analizadas resultaron positivas. En conclusión, la técnica demostró su versatilidad en la detección de Anaplasma sp., y además de ello, se constató la presencia de esta rickettsia en ovinos de Venezuela, lo que hasta el presente no había sido determinada por métodos moleculares.

Autor: Felmer,R

Se evaluaron distintos métodos actualmente disponibles para el diagnóstico de la infección por el virus de la leucosis bovina (VLB). Los métodos empleados fueron AGID en suero, ELISA en muestras de suero y leche y PCR en linfocitos sanguíneos. De un total de 126 animales analizados, AGID identificó un menor número de animales positivos (75) comparado con las pruebas PCR y ELISA aplicadas en muestras de suero y leche (100). Tres animales positivos a AGID fueron negativos a PCR y 28 de las 51 muestras negativas a AGID fueron positivas mediante PCR. La sensibilidad diagnóstica de PCR con respecto a AGID fue de 96%, mientras que la especificidad fue de 45% (kappa 0,45). Todos los animales positivos a AGID fueron también positivos a ELISA aplicado tanto en suero como en leche, mientras que 25 animales negativos a AGID fueron consignados como positivos a ELISA, en ambas muestras biológicas. De esta forma, la sensibilidad diagnóstica de ELISA respecto a AGID fue de un 100%, mientras que la especificidad fue de 51% (kappa 0,55). La menor sensibilidad observada de AGID no es debido a reacciones falso positivas de ELISA y PCR, sino más bien a una mayor sensibilidad de estas últimas, lo que sugiere reconsiderar la utilización del método AGID en aquellos países en que aún se utiliza como método oficial en los programas de erradicación de leucosis.

Autor: FELMER,R.

Caseins are a family of milk proteins that exist in several molecular forms and are the main proteins present in the bovine milk. Genetic variants of these proteins have been associated with the quality and quantity of cheese derived from milk. Genotypes of 278 Frisón Negro Chileno cows were determined for k-casein by restriction fragment length polymorphism analysis of amplified DNA. A 350 bp fragment of the genomic bovine k-casein gene was amplified by PCR. Two HINF I sites were found in the amplified fragment of allele A, one at position 134 and one at position 266; only the latter site is present in allele B. Thus, digests of alleles A yielded 84 bp and 132/134 bp bands and digests of alleles B resulted in 84 bp and 266 bp bands. These bands, and thus genotypes AA, AB and BB, were recognised by agarose gel electrophoresis and ethidium-bromide staining. This technique was used to determine the k-casein allelic frequency in a Frisón Negro dairy herd. The distribution of genotypes was slightly different, and the gene frequencies similar to those reported in the literature. This molecular genetic technique based on molecular markers allows direct genotyping for milk k-casein with certainty and accuracy in bulls and females to be used in programs of dairy cattle improvement. Therefore, an early and precise identification of milk protein genotypes should have a direct impact on dairy cattle breeding strategies

Autor: Ruiz-Barba, José Luis

In this study, we describe a very simple and rapid
method for extraction of both plasmid and chromosomal
DNA from colonies or pellets of bacteria and yeast that is
suitable for subsequent PCR. Our method involves only
chloroform as the cell disrupting and extracting agent, also
contributing to DNA preservation from inherent and contaminating
nucleases.

Autor: Santamaría,Erika

Introducción. En leishmaniasis se acepta que la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ha simplificado el proceso de incriminación vectorial. Sin embargo, pocas veces se ha determinado la sensibilidad y la especificidad de cada PCR en la detección y la identificación del parásito en los flebótomos. Objetivo. Evaluar la aplicabilidad de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), basada en los iniciadores B1 y B2, en la detección e identificación de parásitos de Leishmania (Viannia) en insectos vectores enteros sin disecar. Metodología. Se determinó la sensibilidad y la especificidad de la PCR empleando diluciones de cultivo de parásitos de Leishmania spp. Se estableció el número máximo de hembras de Lutzomyia que pueden ser procesadas a la vez sin disminuir la sensibilidad de la PCR, procesando el ADN de grupos de una a cinco hembras de Lutzomyia en presencia del ADN de las diluciones de cultivo de parásitos. Además, se comparó en grupos de flebótomos infectados experimentalmente, la sensibilidad de esta PCR en la detección de infección por Leishmania (Viannia) frente al método de búsqueda de flagelados por disección del insecto y examen microscópico. Resultados. La PCR detectó desde un parásito de Leishmania (Viannia) y permitió el procesamiento de hasta tres insectos enteros sin alterar la sensibilidad. Los porcentajes de infección experimental detectados con las dos técnicas fueron similares, 33,3% con la PCR y 30% con el examen microscópico. Además, se confirmó que los iniciadores B1 y B2 son específicos para especies del subgénero Leishmania (Viannia). Conclusión. Los resultados obtenidos demuestran la sensibilidad y la especificidad de esta PCR y permiten recomendar su uso en la determinación de infección natural con parásitos de Leishmania (Viannia) en poblaciones silvestres de flebótomos.

Autor: Martín, I.

A polymerase chain reaction (PCR) based on oligonucleotide primers targeting the mitochondrial 12S rRNA gene was developed for the specific identification of rabbit DNA (Oryctolagus cuniculus) in food and feedstuffs. The specificity of the primers was verified by PCR analysis of DNA from 32 non-target species including mammals, birds, fish, and plant species. Analysis of experimental mixtures demonstrated the presence of rabbit-derived materials in the range of 0.1-100%. Prolonged heat treatment (up to 133ºC for 20 min at 300 kPa) applied to rabbit muscle/oats binary mixtures did not affect the performance of the method, which could therefore be said to be very useful for the accurate identification of rabbit materials in products submitted to denaturing technologies when other methods are not suitable.

Autor: Corrales,RM

Objetivo: La superficie ocular expresa al menos cinco de los 17 genes de mucinas descritos hasta ahora. El presente estudio fue diseñado para determinar el perfil de expresión de los genes de mucinas en muestras obtenidas mediante citología por impresión conjuntival (CIC) de sujetos sanos. Métodos: Se aplicaron dos filtros de polietersulfona en la conjuntiva superior de ambos ojos de 8 voluntarios sanos. Posteriormente, se llevó a cabo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) usando el ARN total extraído y retrotranscrito de las muestras de CIC, para posteriormente estudiar la expresión de todos los genes humanos de mucinas conocidos. Después de la amplificación, los productos de la PCR fueron sometidos a electroforesis en un gel de agarosa al 1,5% y teñidos con bromuro de etidio para confirmar la obtención de una única banda cuando los ADNc son amplificados con los adecuados oligonucleótidos. Resultados: Se detectaron los transcritos de los genes de mucinas conjuntivales publicados anteriormente MUC1, MUC2, MUC4, MUC5AC y MUC7 en todas las muestras. Además, también se detectaron los transcritos de los genes de mucinas MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17. Los productos amplificados mediante PCR convencional mostraron el tamaño de amplificación esperado. No se detectaron transcritos de los genes de mucinas MUC3A, MUC3B, MUC5B, MUC6, MUC8, MUC11 y MUC12. Conclusión: Por primera vez, se ha demostrado la expresión de cuatro ARNm de mucinas (MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17) en el epitelio conjuntival humano de voluntarios sanos, hecho aún inédito. La función de estos genes habrá de ser estudiada posteriormente.

Autor: Martín, M. Cruz

Three food poisoning restaurant outbreaks due to Staphylococcus aureus, occurring during June–October 2002 in the Principality of Asturias (PA), Spain, provided the basis for investigating some aspects of the molecular epidemiology of this organism. The methods applied to identify strains and lineages included multiplex-polymerase chain reaction (PCR) to detect nine enterotoxin (se) genes, and three DNA fingerprinting procedures: pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) with SmaI, randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) with two selected primers, and plasmid restriction analysis with HindIII. Thirty-two isolates were differentiated into three non-se and 12 se strains, which were outbreak-specific, except for one that was represented in two of the outbreaks. In outbreak 1, the 16 food isolates analyzed had sec, seg and sei genes and generated a distinctive DNA fingerprint, being assigned to a single strain. This strain could be categorized as endemic in the PA and associated to manually handled dairy products and nasal carriers. In outbreak 2, the four food isolates analyzed fell into three strains, each one displaying a different se-gene profile (sea, sec and seg-seh-sei) and a distinctive DNA fingerprint. In outbreak 3, the five food isolates tested fell into four seg-sei strains generating identical RAPD but different PFGE and plasmid profiles, and one sea strain also collected from two nasal carriers. This last strain had also been found in manually handled vegetables in outbreak 2, and it belongs to a not very frequently found sea lineage in the PA. Multiplex-PCR to detect se genes together with the three applied DNA fingerprint typing procedures proved therefore to be useful tools in subclassifying S. aureus for epidemiological purposes.

Autor: Calderón E,Róger

Objetivo: Detectar tempranamente la susceptibilidad a las drogas antituberculosas rifampicina e isoniacida mediante PCR y electroforesis conformacional. Materiales y métodos: Se implementaron dos ensayos de amplificación de los genes rpoB y katG y mediante Heteroduplex y SSCP se determinó la susceptibilidad antituberculosa de 31 muestras clínicas procedentes de pacientes con diagnóstico de tuberculosis pulmonar baciloscopía positiva. La caracterización fenotípica de la susceptibilidad, se realizó empleando el método de las proporciones. Resultados: Los ensayos de PCR detectaron hasta 2,5 pg de ADN genómico de M. tuberculosis; no amplificando ADN de otras micobacterias y bacterias comunes de la flora bucal. Se encontró una concordancia general entre la detección molecular y convencional de la susceptibilidad a rifampicina e isoniacida de 96,7% y 83,9% (p<0,05), respectivamente. Sin embargo, sólo en pacientes con antecedente de tratamiento se presentó una concordancia del 100% y 90,9% (p<0,05) para rifampicina e isoniacida, respectivamente. Además, este sistema de detección de resistencia puede emitir resultados 48 horas después de la recepción de la muestra clínica. Conclusiones: Estos sistemas se presentan como una excelente alternativa para la identificación temprana de pacientes infectados con bacilos de M. tuberculosis drogoresistentes. Potencialmente, se podrán dirigir óptimos y oportunos esquemas terapéuticos que contribuirán con el control y prevención de la transmisión de cepas multidrogo-resistentes que afectan en gran medida a la salud pública de nuestro país.

Autor: Park,Daniel J

The determination of genomic DNA sequence flanking a known region is often problematic. Existing technologies depend on multiple, efficient enzyme-catalysed preparative processing steps and/or rely on relatively inefficient ‘one-sided' PCR mechanisms. I demonstrate the application of a simple ‘two-sided' PCR-based approach, lariat-dependent nested PCR for rapid amplification of genomic DNA ends (LaNe RAGE), applied to the mouse GAPDH and PGK1 gene flanking sequences. This demonstration offers great promise in applications such as genome walking, transposon mutagenesis mapping and DNA fingerprinting

Autor: Cervantes-Díaz,Lourdes

En plantaciones de alstroemeria (Alstroemeria L.) de Villa Guerrero, Estado de México, se han detectado plantas con síntomas similares a los inducidos por geminivirus en otros cultivos hortícolas. En dichas plantaciones también se ha observado la presencia de la mosquita blanca, considerada como el vector más eficiente de estos virus. El objetivo del presente trabajo fue detectar la presencia de geminivirus en plantas de alstroemeria. Mediante PCR, usando los iniciadores MotCP2118/MotCP2123, se obtuvo un segmento de ~600pb, similar al del control positivo correspondiente a chile infectado con el begomovirus pepper huasteco yellow vein virus (PHYVV, antes pepper huasteco virus) en plantas sintomáticas, mientras que en las asintomáticas la detección fue negativa. Plantas de Nicotiana glutinosa, N. benthamiana, N. rustica, N. tabacum var. xanthi y Datura stramonium inoculadas por biobalística con ADN total obtenido de alstroemerias con síntomas y positivas a PHYVV mediante PCR, mostraron mosaicos leves y deformación de hojas, mientras que en plantas de Capsicum annuum se observaron mosaicos, necrosis en nervaduras y abultamientos en hojas. Con el ADN de estas plantas también se obtuvieron bandas correspondientes al PHYVV, pero en las monocotiledóneas bombardeadas, incluyendo alstroemeria, no fue detectado el fragmento. La secuencia de oligonucleótidos de los productos de PCR mostró 98% de homología con el begomovirus PHYVV. Aunque no fue posible reproducir en alstroemeria los síntomas observados en campo, sí se evidenció mediante PCR la presencia de un geminivirus similar al PHYVV en tejido de plantas sintomáticas.

Autor: Morales Loredo,Alberto

En México, la tuberculosis (TB) es motivo de regionalización del país de acuerdo a la prevalencia, por tal motivo, la comercialización y/o exportación de bovinos, así como su movilización, es restringida. El diagnóstico oficial de la TB en bovinos en campo se realiza con la prueba de tuberculina, y posmorten con histopatología y/o por aislamiento del agente etiológico. Aunque la prueba de la tuberculina tiene baja especificidad, es suficiente para enviar animales reactores a sacrificio, lo que no garantiza que el animal esté infectado. Lo anterior, hace patente la necesidad de métodos más sensibles y específicos. En la presente investigación se analizaron muestras de exudado nasal de bovinos, para detectar microorganismos del complejo Mycobacterium tuberculosis mediante la prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Todos los animales positivos a la tuberculina se consideraron como animales infectados y éstos fueron comparados con los positivos a PCR. Se muestrearon 420 animales provenientes de zonas de alta y baja prevalencia. El ADN de los exudados nasales se obtuvo con el método de extracción bromuro de cetiltrimetilamonio, y éste se utilizó en una PCR anidada para amplificar dos fragmentos (583 pb y 200 pb) de la secuencia IS6110 del complejo M. tuberculosis. La prueba de PCR logró detectar un mayor número de muestras positivas en las zonas de alta prevalencia (57%), comparada con las zonas de baja prevalencia (20%). La sensibilidad de la prueba de PCR fue del 90,5% y la especificidad del 58,3%, comparada con la prueba de tuberculina. Quedó demostrado que la prueba de PCR en secreciones nasales puede utilizarse en situaciones de compra-venta o en exposiciones ganaderas como un análisis de tamizaje para prevenir el contagio y la introducción de la enfermedad a rebaños sanos.

Autor: Gallegos,Miguel

Muchos de los brotes causados por Escherichia coli O157:H7 se han asociado al consumo de carne bovina mal cocida, pero también se ha reportado su presencia en la carne de otros animales domésticos. En México existe poca información sobre la presencia de este patógeno en canales de res y de cerdo. El objetivo de este estudio fue determinar la presencia de E. coli O157:H7 en canales de res y cerdo y su caracterización mediante PCR. De un total de 18 aislados, 12 fueron positivas por PCR para los genes rfbE y fliC que determinan el serotipo O157:H7. De estos 12, uno de canal de res y tres de canales de cerdo fueron positivos por PCR para los genes stx1, stx2 y eaeA, por lo que fueron considerados como enterohemorrágicos. Las diferencias encontradas en el número de canales positivas para los genes caracterizados no fueron estadísticamente significativas, y los resultados señalan que E. coli O157:H7 puede ser encontrada en ambos tipos de canal, representando un riesgo para la salud, por lo que se deben tomar medidas más estrictas de higiene y manejo para evitar que canales que no cumplan con el carácter de inocuidad lleguen a los consumidores finales.

Autor: Flórez,Mónica

Introducción. Entre los años 1998-2000 la aparición de 8 casos de leishmaniosis visceral americana en niños de un asentamiento humano de reciente establecimiento en la localidad de Guatiguará del municipio de Piedecuesta (Santander Colombia), señaló la posible presencia de un ciclo de transmisión de Leishmania en dicho lugar que motivó el presente estudio entomológico. Objetivos. Determinar frecuencia relativa en el intra y peridomicilio de Lutzomyia longipalpis y la infección natural de este vector con Leishmania spp. Materiales y métodos. Se utilizaron para el muestreo trampas CDC intra y peridomiciliares, capturas sobre cebo humano, cebo animal y en sitios de reposo, en el periodo de mayo de 1999 a septiembre del 2000. La infección natural se determinó mediante la técnica de PCR, en pooles de hembras de Lutzomyia longipalpis. Resultados. Se capturaron 7.391 flebótomos. La especie predominante fue Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva), con un 99,5% de las capturas. En las recolecciones con trampas de luz CDC, L. longipalpis tuvo una mayor frecuencia en el intradomicilio que en el peridomicilio (p=0,0001). La tasa total de infección natural fue del 1,93% y se observó una correlación positiva entre los meses de mayor abundancia y el número de hembras infectadas que ingresan al domicilio. Conclusiones. Los resultados indican que en la localidad de Guatiguará Lutzomyia longipalpis, presenta tendencias marcadas hacia el intradomicilio, lo cual tiene serias implicaciones en la transmisión por cuanto el riesgo de transmisión se ve aumentado durante los meses de mayor abundancia por el ingreso de un mayor número de hembras infectadas. Desde el punto de vista de control este comportamiento permite diseñar estrategias que disminuyan la transmisión del parásito en el interior del domicilio.

Autor: Zúñiga,Javier

La calidad panadera es un importante elemento para el desarrollo de nuevas variedades de trigo (Triticum aestivum L.) y se asocia principalmente con un conjunto de proteínas conocidas como gluteninas de elevado peso molecular (HMW), aún cuando existen otras proteínas relacionadas con la calidad panadera. Los procesos actuales de selección de genotipos con calidad panadera se basan en el contenido de gluten de la masa o la identificación de alelos codificadores de gluteninas HMW mediante electroforesis. Se reporta un método basado en la identificación, mediante la reacción en cadena de la ADN polimerasa (PCR), del alelo codificador de la glutenina HMWx5, la cual se asocia con calidad panadera. Mediante el uso de partidores apropiados se amplificó de forma específica un fragmento del promotor de este gen y parte de su extremo 5’. En aquellos genotipos portadores del gen HMWx5 se amplificó un fragmento de aproximadamente 450 pares de bases (pb) el cual es consistente con el tamaño esperado a partir de su secuencia depositada en la base de datos Genbank. Su alelo HMWx2 no amplificó producto PCR alguno. El sistema fue validado en un grupo de genotipos de trigos de diverso origen y permitió la rápida e inequívoca identificación de genotipos portadores del alelo HMWx5. El desarrollo del sistema y otros análogos permitirá el desarrollo de sistemas de mejoramiento genético de trigo más efectivos y focalizados.

Autor: Espinoza,Milagros

Estudios han comprobado que concentraciones elevadas de colesterol total a expensas del colesterol LDL y marcadores de inflamación, se relacionan con ateroesclerosis subclínica. El objetivo del estudio fue determinar la asociación de los niveles séricos de la proteína C reactiva ultrasensible (PCRus) con la medida del grosor de la íntima media carotídea (GIMCa) en pacientes hipercolesterolémicos. La investigación fue descriptiva, transversal e incluyó 100 pacientes divididos en grupo control (normocolesterolémico) y grupo estudio (hipercolesterolémico). No se observaron diferencias en edad y distribución por género entre los grupos. El índice de masa corporal, circunferencia abdominal, colesterol total y sus fracciones, GIMCa y PCRus se encontraron significativamente elevados en el grupo estudio. Sólo en el grupo hipercolesterolémico, el GIMCa se asoció significativamente con la PCRus. En el grupo estudio, el GIMCa promedio se elevó a través de los cuartiles de PCRus, adquiriendo su máximo valor en el cuarto cuartil. El análisis de regresión lineal múltiple identificó al colesterol unido a la LDLc y a la PCRus como predictores del GIMCa sólo en el grupo estudio. La evidencia encontrada apoya otros datos que apuntan a que no sólo el colesterol unido a la LDL sino también la PCRus podría ser un importante factor de cambios ateroscleróticos tempranos en la arteria carótida de pacientes con hipercolesterolemia aislada.

Autor: Zúñiga,Javier

La calidad panadera es un importante elemento para el desarrollo de nuevas variedades de trigo (Triticum aestivum L.) y se asocia principalmente con un conjunto de proteínas conocidas como gluteninas de elevado peso molecular (HMW), aún cuando existen otras proteínas relacionadas con la calidad panadera. Los procesos actuales de selección de genotipos con calidad panadera se basan en el contenido de gluten de la masa o la identificación de alelos codificadores de gluteninas HMW mediante electroforesis. Se reporta un método basado en la identificación, mediante la reacción en cadena de la ADN polimerasa (PCR), del alelo codificador de la glutenina HMWx5, la cual se asocia con calidad panadera. Mediante el uso de partidores apropiados se amplificó de forma específica un fragmento del promotor de este gen y parte de su extremo 5’. En aquellos genotipos portadores del gen HMWx5 se amplificó un fragmento de aproximadamente 450 pares de bases (pb) el cual es consistente con el tamaño esperado a partir de su secuencia depositada en la base de datos Genbank. Su alelo HMWx2 no amplificó producto PCR alguno. El sistema fue validado en un grupo de genotipos de trigos de diverso origen y permitió la rápida e inequívoca identificación de genotipos portadores del alelo HMWx5. El desarrollo del sistema y otros análogos permitirá el desarrollo de sistemas de mejoramiento genético de trigo más efectivos y focalizados.

Autor: Medina Sierra,Marisol

Se evaluó la presencia de hongos micorrizógenos arbusculares (HMA) en suelos de zonas alteradas y no alteradas por minería de aluvión de los subgrupos Tropic Fluvaquent, Typic Dystropept y Typic Paleudult de terrazas Baja, Media, y Alta, respectivamente, del río Cauca a la altura del municipio de Tarazá (Antioquia, Colombia). La multiplicación de propágulos de HMA se realizó en jarras de Leonard en invernadero, utilizando sustrato estéril, solución Hoagland's modificada y como inóculo diferentes fracciones de suelo correspondientes al tamaño de las esporas. Se realizó un primer ensayo en maíz (Zea mays) en el cual se logró colonización de las raíces pero no esporulación; en un segundo ensayo en kudzú (Pueraria phaseoloides) se logró colonización y esporulación en los tratamientos provenientes de suelo de terraza alta y suelo disturbado y efecto significativo en el rendimiento del kudzú (P≤0,001) respecto a los demás tratamientos. Las esporas de suelos disturbados y no disturbados por minería de aluvión en el Bajo Cauca antioqueño (Colombia) mostraron baja capacidad infectiva; sin embargo, en cultivos trampa fue posible multiplicar HMA que produjeron esporas de cuatro morfotipos diferentes, uno de los cuales se identificó como G. microagregatum. El polimorfismo de los morfotipos obtenidos mediante la técnica de RAPD's permitió diferenciarlos con el cebador OPA2 y el agrupamiento por UPGMA con todos los cebadores mostró similitud mayor al 38% entre ellos. Los resultados moleculares y morfológicos, permitieron ubicar los cuatro morfotipos en el género Glomus pero posiblemente pertenecen a especies diferentes. Los resultados obtenidos son promisorios en la diferenciación de cepas nativas con bajo número de esporas colectadas a partir de muestras de suelos en proceso de rehabilitación, de los cuales no se conoce su composición de HMA.