Jueves, 24 de abril de 2014
PCR

Autor: Felmer,R

Se evaluaron distintos métodos actualmente disponibles para el diagnóstico de la infección por el virus de la leucosis bovina (VLB). Los métodos empleados fueron AGID en suero, ELISA en muestras de suero y leche y PCR en linfocitos sanguíneos. De un total de 126 animales analizados, AGID identificó un menor número de animales positivos (75) comparado con las pruebas PCR y ELISA aplicadas en muestras de suero y leche (100). Tres animales positivos a AGID fueron negativos a PCR y 28 de las 51 muestras negativas a AGID fueron positivas mediante PCR. La sensibilidad diagnóstica de PCR con respecto a AGID fue de 96%, mientras que la especificidad fue de 45% (kappa 0,45). Todos los animales positivos a AGID fueron también positivos a ELISA aplicado tanto en suero como en leche, mientras que 25 animales negativos a AGID fueron consignados como positivos a ELISA, en ambas muestras biológicas. De esta forma, la sensibilidad diagnóstica de ELISA respecto a AGID fue de un 100%, mientras que la especificidad fue de 51% (kappa 0,55). La menor sensibilidad observada de AGID no es debido a reacciones falso positivas de ELISA y PCR, sino más bien a una mayor sensibilidad de estas últimas, lo que sugiere reconsiderar la utilización del método AGID en aquellos países en que aún se utiliza como método oficial en los programas de erradicación de leucosis.

Autor: FELMER,R.

Caseins are a family of milk proteins that exist in several molecular forms and are the main proteins present in the bovine milk. Genetic variants of these proteins have been associated with the quality and quantity of cheese derived from milk. Genotypes of 278 Frisón Negro Chileno cows were determined for k-casein by restriction fragment length polymorphism analysis of amplified DNA. A 350 bp fragment of the genomic bovine k-casein gene was amplified by PCR. Two HINF I sites were found in the amplified fragment of allele A, one at position 134 and one at position 266; only the latter site is present in allele B. Thus, digests of alleles A yielded 84 bp and 132/134 bp bands and digests of alleles B resulted in 84 bp and 266 bp bands. These bands, and thus genotypes AA, AB and BB, were recognised by agarose gel electrophoresis and ethidium-bromide staining. This technique was used to determine the k-casein allelic frequency in a Frisón Negro dairy herd. The distribution of genotypes was slightly different, and the gene frequencies similar to those reported in the literature. This molecular genetic technique based on molecular markers allows direct genotyping for milk k-casein with certainty and accuracy in bulls and females to be used in programs of dairy cattle improvement. Therefore, an early and precise identification of milk protein genotypes should have a direct impact on dairy cattle breeding strategies

Autor: LORA,FABIANA

Antecedentes. Es necesario conocer el grado de exposición a Toxoplasma gondii en la carne de diferentes especies para consumo humano en Colombia. Objetivo. Detectar material genómico de T. gondii por la técnica de PCR en muestras de carne de res, cerdo y pollo obtenidas en Armenia, Manizales y Pereira, con el fin de establecer el tipo de carne y la ciudad en donde es más frecuente el hallazgo del parásito. Materiales y métodos. En cada ciudad se obtuvieron 20 muestras por tipo de carne de establecimientos comerciales clasificados en estratos. Se extrajeron 180 muestras de ADN, las cuales se utilizaron para realizar una PCR anidada ( nested PCR) con el fin de obtener una región de 160 pares de bases específica de T. gondii. Resultados. El 52,7% de las muestras de carne tomadas fueron positivas para la presencia de T. gondii. La carne de cerdo fue la más contaminada (70%), con mayor prevalencia en Manizales (80%), seguida por la carne de res en Armenia con 80% de resultados positivos y, por último, la carne de pollo en Pereira presentó la prevalencia más alta (70%). No hubo muestras positivas en pollos en Manizales. Conclusión. Se concluye que existe un alto grado de exposición en los tres tipos de carne analizados, los cuales se pueden considerar como alimentos de riesgo potencial para la transmisión de la infección. Estos resultados indican que se deben determinar los niveles de infección de estas carnes en el país.

Autor: Fernández García, María

The consumption of food and beverages containing high amounts of biogenic amines (BA) can have toxicological effects. BA found in foods and beverages are synthesized by the microbial decarboxylation of certain amino acids. This paper reports the concentrations of BAs in a number of commercial cheeses, as determined by HPLC. The cheeses studied were made from raw and pasteurized milk of different origin, and were subjected to different ripening periods. BA concentrations were lower in short ripening period than in long ripening period cheeses, and higher in cheeses made from raw milk than in those made from pasteurized milk. The highest BA concentrations were recorded in blue cheeses made from raw milk. Tyramine was the most commonly recorded and abundant BA. The presence of tyramine-producing bacteria was determined by PCR, and a good correlation obtained between the results of this method and tyramine detection by HPLC. These methods could be used to complement one another in the detection and quantification of tyramine in cheese prevention of tyramine accumulation in cheese.

Autor: Ruiz-Barba, José Luis

In this study, we describe a very simple and rapid
method for extraction of both plasmid and chromosomal
DNA from colonies or pellets of bacteria and yeast that is
suitable for subsequent PCR. Our method involves only
chloroform as the cell disrupting and extracting agent, also
contributing to DNA preservation from inherent and contaminating
nucleases.

Autor: Santamaría,Erika

Introducción. En leishmaniasis se acepta que la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ha simplificado el proceso de incriminación vectorial. Sin embargo, pocas veces se ha determinado la sensibilidad y la especificidad de cada PCR en la detección y la identificación del parásito en los flebótomos. Objetivo. Evaluar la aplicabilidad de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), basada en los iniciadores B1 y B2, en la detección e identificación de parásitos de Leishmania (Viannia) en insectos vectores enteros sin disecar. Metodología. Se determinó la sensibilidad y la especificidad de la PCR empleando diluciones de cultivo de parásitos de Leishmania spp. Se estableció el número máximo de hembras de Lutzomyia que pueden ser procesadas a la vez sin disminuir la sensibilidad de la PCR, procesando el ADN de grupos de una a cinco hembras de Lutzomyia en presencia del ADN de las diluciones de cultivo de parásitos. Además, se comparó en grupos de flebótomos infectados experimentalmente, la sensibilidad de esta PCR en la detección de infección por Leishmania (Viannia) frente al método de búsqueda de flagelados por disección del insecto y examen microscópico. Resultados. La PCR detectó desde un parásito de Leishmania (Viannia) y permitió el procesamiento de hasta tres insectos enteros sin alterar la sensibilidad. Los porcentajes de infección experimental detectados con las dos técnicas fueron similares, 33,3% con la PCR y 30% con el examen microscópico. Además, se confirmó que los iniciadores B1 y B2 son específicos para especies del subgénero Leishmania (Viannia). Conclusión. Los resultados obtenidos demuestran la sensibilidad y la especificidad de esta PCR y permiten recomendar su uso en la determinación de infección natural con parásitos de Leishmania (Viannia) en poblaciones silvestres de flebótomos.

Autor: Martín, I.

A polymerase chain reaction (PCR) based on oligonucleotide primers targeting the mitochondrial 12S rRNA gene was developed for the specific identification of rabbit DNA (Oryctolagus cuniculus) in food and feedstuffs. The specificity of the primers was verified by PCR analysis of DNA from 32 non-target species including mammals, birds, fish, and plant species. Analysis of experimental mixtures demonstrated the presence of rabbit-derived materials in the range of 0.1-100%. Prolonged heat treatment (up to 133ºC for 20 min at 300 kPa) applied to rabbit muscle/oats binary mixtures did not affect the performance of the method, which could therefore be said to be very useful for the accurate identification of rabbit materials in products submitted to denaturing technologies when other methods are not suitable.

Autor: Corrales,RM

Objetivo: La superficie ocular expresa al menos cinco de los 17 genes de mucinas descritos hasta ahora. El presente estudio fue diseñado para determinar el perfil de expresión de los genes de mucinas en muestras obtenidas mediante citología por impresión conjuntival (CIC) de sujetos sanos. Métodos: Se aplicaron dos filtros de polietersulfona en la conjuntiva superior de ambos ojos de 8 voluntarios sanos. Posteriormente, se llevó a cabo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) usando el ARN total extraído y retrotranscrito de las muestras de CIC, para posteriormente estudiar la expresión de todos los genes humanos de mucinas conocidos. Después de la amplificación, los productos de la PCR fueron sometidos a electroforesis en un gel de agarosa al 1,5% y teñidos con bromuro de etidio para confirmar la obtención de una única banda cuando los ADNc son amplificados con los adecuados oligonucleótidos. Resultados: Se detectaron los transcritos de los genes de mucinas conjuntivales publicados anteriormente MUC1, MUC2, MUC4, MUC5AC y MUC7 en todas las muestras. Además, también se detectaron los transcritos de los genes de mucinas MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17. Los productos amplificados mediante PCR convencional mostraron el tamaño de amplificación esperado. No se detectaron transcritos de los genes de mucinas MUC3A, MUC3B, MUC5B, MUC6, MUC8, MUC11 y MUC12. Conclusión: Por primera vez, se ha demostrado la expresión de cuatro ARNm de mucinas (MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17) en el epitelio conjuntival humano de voluntarios sanos, hecho aún inédito. La función de estos genes habrá de ser estudiada posteriormente.

Autor: Park,Daniel J

The determination of genomic DNA sequence flanking a known region is often problematic. Existing technologies depend on multiple, efficient enzyme-catalysed preparative processing steps and/or rely on relatively inefficient ‘one-sided' PCR mechanisms. I demonstrate the application of a simple ‘two-sided' PCR-based approach, lariat-dependent nested PCR for rapid amplification of genomic DNA ends (LaNe RAGE), applied to the mouse GAPDH and PGK1 gene flanking sequences. This demonstration offers great promise in applications such as genome walking, transposon mutagenesis mapping and DNA fingerprinting

Autor: González,María C

El análisis de polimorfismo en la conformación de cadenas sencillas (SSCP, por sus siglas en inglés) se utilizó para caracterizar regiones del genoma de tres cepas de virus de encefalitis equina del este (VEEE), aisladas de cerebros de equinos muertos. Los segmentos de ARN fueron amplificados mediante la transcriptasa reversa acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR). Se analizó un fragmento de 542 pb de la región 3’no traducible del ARNm 26S y un fragmento de 532 pb del gen de la proteína no estructural P4 (nsP4), encontrándose que la migración de las cadenas sencillas de estos fragmentos de ADNc fueron diferentes en estos aislados virales, lo que indica que presentan polimorfismo genético en estas regiones del genoma, el cual es característico de cepas de VEEE, variantes Sur Americanas.

Autor: Cervantes-Díaz,Lourdes

En plantaciones de alstroemeria (Alstroemeria L.) de Villa Guerrero, Estado de México, se han detectado plantas con síntomas similares a los inducidos por geminivirus en otros cultivos hortícolas. En dichas plantaciones también se ha observado la presencia de la mosquita blanca, considerada como el vector más eficiente de estos virus. El objetivo del presente trabajo fue detectar la presencia de geminivirus en plantas de alstroemeria. Mediante PCR, usando los iniciadores MotCP2118/MotCP2123, se obtuvo un segmento de ~600pb, similar al del control positivo correspondiente a chile infectado con el begomovirus pepper huasteco yellow vein virus (PHYVV, antes pepper huasteco virus) en plantas sintomáticas, mientras que en las asintomáticas la detección fue negativa. Plantas de Nicotiana glutinosa, N. benthamiana, N. rustica, N. tabacum var. xanthi y Datura stramonium inoculadas por biobalística con ADN total obtenido de alstroemerias con síntomas y positivas a PHYVV mediante PCR, mostraron mosaicos leves y deformación de hojas, mientras que en plantas de Capsicum annuum se observaron mosaicos, necrosis en nervaduras y abultamientos en hojas. Con el ADN de estas plantas también se obtuvieron bandas correspondientes al PHYVV, pero en las monocotiledóneas bombardeadas, incluyendo alstroemeria, no fue detectado el fragmento. La secuencia de oligonucleótidos de los productos de PCR mostró 98% de homología con el begomovirus PHYVV. Aunque no fue posible reproducir en alstroemeria los síntomas observados en campo, sí se evidenció mediante PCR la presencia de un geminivirus similar al PHYVV en tejido de plantas sintomáticas.

Autor: Morales Loredo,Alberto

En México, la tuberculosis (TB) es motivo de regionalización del país de acuerdo a la prevalencia, por tal motivo, la comercialización y/o exportación de bovinos, así como su movilización, es restringida. El diagnóstico oficial de la TB en bovinos en campo se realiza con la prueba de tuberculina, y posmorten con histopatología y/o por aislamiento del agente etiológico. Aunque la prueba de la tuberculina tiene baja especificidad, es suficiente para enviar animales reactores a sacrificio, lo que no garantiza que el animal esté infectado. Lo anterior, hace patente la necesidad de métodos más sensibles y específicos. En la presente investigación se analizaron muestras de exudado nasal de bovinos, para detectar microorganismos del complejo Mycobacterium tuberculosis mediante la prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Todos los animales positivos a la tuberculina se consideraron como animales infectados y éstos fueron comparados con los positivos a PCR. Se muestrearon 420 animales provenientes de zonas de alta y baja prevalencia. El ADN de los exudados nasales se obtuvo con el método de extracción bromuro de cetiltrimetilamonio, y éste se utilizó en una PCR anidada para amplificar dos fragmentos (583 pb y 200 pb) de la secuencia IS6110 del complejo M. tuberculosis. La prueba de PCR logró detectar un mayor número de muestras positivas en las zonas de alta prevalencia (57%), comparada con las zonas de baja prevalencia (20%). La sensibilidad de la prueba de PCR fue del 90,5% y la especificidad del 58,3%, comparada con la prueba de tuberculina. Quedó demostrado que la prueba de PCR en secreciones nasales puede utilizarse en situaciones de compra-venta o en exposiciones ganaderas como un análisis de tamizaje para prevenir el contagio y la introducción de la enfermedad a rebaños sanos.

Autor: Dervis, Sibel

A comprehensive survey on the prevalence
and incidence of Verticillium wilt of olive in Turkey
has been conducted over 6 years (2003–2008).
Vegetative compatibility group (VCG) assessment
and PCR-based molecular pathotyping were used to
evaluate the distribution of the defoliating (D) and
nondefoliating (ND) pathotypes of Verticillium dahliae
in surveyed areas. Pathogen prevalence was 35%
of all olive orchards inspected and incidence of the
disease reached 3.1%. VCG1A was predominant
(29.3%) and infected all major cultivars grown in
Turkey. The other two VCGs detected (2A and 4B)
were of minor relevance (4.9% and 0.9%, respectively). Disease incidence caused by VCG1A infections
was higher (ranging from 1.1% to 6.9%) than
that caused by VCG2A and VCG4B in 10 provinces
(Manisa, Aydin, Kahramanmaras, Izmir, Mugla,
Kilis, Denizli, Gaziantep, Mardin and Balikesir).
However, VCG2A and 4B were more prevalent (and
responsible for higher disease incidence) than
VCG1A in three provinces (Hatay, Osmaniye and
Bursa). Finally, VCG1A isolates were found in all
provinces except Canakkale, and simultaneous presence
of the three VCGs was only verified in Hatay
province. An artificial inoculation bioassay (19
representative V. dahliae isolates included) revealed
that VCG1A (13) isolates as a group were more
aggressive and caused defoliation, whereas VCG2A
(5) and VCG4B (1) isolates induced milder symptoms.
Within a VCG group, virulence varied among
isolates infecting the same olive cultivar and this
virulence was also related to the differential susceptibility
of the cultivars (‘Manzanilla’, ‘Ayvalik’ and
‘Gemlik’) tested. Molecular pathotyping allowed the
identification of D (VCG1A) and ND (VCG2A/4B)
pathotypes, which correlated with results from
pathogenicity tests. Remarkably, the V. dahliae
VCG1A/D pathotype population infecting olive in
Turkey was molecularly different from that one
previously identified in Spain.

Autor: Gallegos,Miguel

Muchos de los brotes causados por Escherichia coli O157:H7 se han asociado al consumo de carne bovina mal cocida, pero también se ha reportado su presencia en la carne de otros animales domésticos. En México existe poca información sobre la presencia de este patógeno en canales de res y de cerdo. El objetivo de este estudio fue determinar la presencia de E. coli O157:H7 en canales de res y cerdo y su caracterización mediante PCR. De un total de 18 aislados, 12 fueron positivas por PCR para los genes rfbE y fliC que determinan el serotipo O157:H7. De estos 12, uno de canal de res y tres de canales de cerdo fueron positivos por PCR para los genes stx1, stx2 y eaeA, por lo que fueron considerados como enterohemorrágicos. Las diferencias encontradas en el número de canales positivas para los genes caracterizados no fueron estadísticamente significativas, y los resultados señalan que E. coli O157:H7 puede ser encontrada en ambos tipos de canal, representando un riesgo para la salud, por lo que se deben tomar medidas más estrictas de higiene y manejo para evitar que canales que no cumplan con el carácter de inocuidad lleguen a los consumidores finales.

Autor: Flórez,Mónica

Introducción. Entre los años 1998-2000 la aparición de 8 casos de leishmaniosis visceral americana en niños de un asentamiento humano de reciente establecimiento en la localidad de Guatiguará del municipio de Piedecuesta (Santander Colombia), señaló la posible presencia de un ciclo de transmisión de Leishmania en dicho lugar que motivó el presente estudio entomológico. Objetivos. Determinar frecuencia relativa en el intra y peridomicilio de Lutzomyia longipalpis y la infección natural de este vector con Leishmania spp. Materiales y métodos. Se utilizaron para el muestreo trampas CDC intra y peridomiciliares, capturas sobre cebo humano, cebo animal y en sitios de reposo, en el periodo de mayo de 1999 a septiembre del 2000. La infección natural se determinó mediante la técnica de PCR, en pooles de hembras de Lutzomyia longipalpis. Resultados. Se capturaron 7.391 flebótomos. La especie predominante fue Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva), con un 99,5% de las capturas. En las recolecciones con trampas de luz CDC, L. longipalpis tuvo una mayor frecuencia en el intradomicilio que en el peridomicilio (p=0,0001). La tasa total de infección natural fue del 1,93% y se observó una correlación positiva entre los meses de mayor abundancia y el número de hembras infectadas que ingresan al domicilio. Conclusiones. Los resultados indican que en la localidad de Guatiguará Lutzomyia longipalpis, presenta tendencias marcadas hacia el intradomicilio, lo cual tiene serias implicaciones en la transmisión por cuanto el riesgo de transmisión se ve aumentado durante los meses de mayor abundancia por el ingreso de un mayor número de hembras infectadas. Desde el punto de vista de control este comportamiento permite diseñar estrategias que disminuyan la transmisión del parásito en el interior del domicilio.

Autor: Zúñiga,Javier

La calidad panadera es un importante elemento para el desarrollo de nuevas variedades de trigo (Triticum aestivum L.) y se asocia principalmente con un conjunto de proteínas conocidas como gluteninas de elevado peso molecular (HMW), aún cuando existen otras proteínas relacionadas con la calidad panadera. Los procesos actuales de selección de genotipos con calidad panadera se basan en el contenido de gluten de la masa o la identificación de alelos codificadores de gluteninas HMW mediante electroforesis. Se reporta un método basado en la identificación, mediante la reacción en cadena de la ADN polimerasa (PCR), del alelo codificador de la glutenina HMWx5, la cual se asocia con calidad panadera. Mediante el uso de partidores apropiados se amplificó de forma específica un fragmento del promotor de este gen y parte de su extremo 5’. En aquellos genotipos portadores del gen HMWx5 se amplificó un fragmento de aproximadamente 450 pares de bases (pb) el cual es consistente con el tamaño esperado a partir de su secuencia depositada en la base de datos Genbank. Su alelo HMWx2 no amplificó producto PCR alguno. El sistema fue validado en un grupo de genotipos de trigos de diverso origen y permitió la rápida e inequívoca identificación de genotipos portadores del alelo HMWx5. El desarrollo del sistema y otros análogos permitirá el desarrollo de sistemas de mejoramiento genético de trigo más efectivos y focalizados.

Autor: Zúñiga,Javier

La calidad panadera es un importante elemento para el desarrollo de nuevas variedades de trigo (Triticum aestivum L.) y se asocia principalmente con un conjunto de proteínas conocidas como gluteninas de elevado peso molecular (HMW), aún cuando existen otras proteínas relacionadas con la calidad panadera. Los procesos actuales de selección de genotipos con calidad panadera se basan en el contenido de gluten de la masa o la identificación de alelos codificadores de gluteninas HMW mediante electroforesis. Se reporta un método basado en la identificación, mediante la reacción en cadena de la ADN polimerasa (PCR), del alelo codificador de la glutenina HMWx5, la cual se asocia con calidad panadera. Mediante el uso de partidores apropiados se amplificó de forma específica un fragmento del promotor de este gen y parte de su extremo 5’. En aquellos genotipos portadores del gen HMWx5 se amplificó un fragmento de aproximadamente 450 pares de bases (pb) el cual es consistente con el tamaño esperado a partir de su secuencia depositada en la base de datos Genbank. Su alelo HMWx2 no amplificó producto PCR alguno. El sistema fue validado en un grupo de genotipos de trigos de diverso origen y permitió la rápida e inequívoca identificación de genotipos portadores del alelo HMWx5. El desarrollo del sistema y otros análogos permitirá el desarrollo de sistemas de mejoramiento genético de trigo más efectivos y focalizados.

Autor: Medina Sierra,Marisol

Se evaluó la presencia de hongos micorrizógenos arbusculares (HMA) en suelos de zonas alteradas y no alteradas por minería de aluvión de los subgrupos Tropic Fluvaquent, Typic Dystropept y Typic Paleudult de terrazas Baja, Media, y Alta, respectivamente, del río Cauca a la altura del municipio de Tarazá (Antioquia, Colombia). La multiplicación de propágulos de HMA se realizó en jarras de Leonard en invernadero, utilizando sustrato estéril, solución Hoagland's modificada y como inóculo diferentes fracciones de suelo correspondientes al tamaño de las esporas. Se realizó un primer ensayo en maíz (Zea mays) en el cual se logró colonización de las raíces pero no esporulación; en un segundo ensayo en kudzú (Pueraria phaseoloides) se logró colonización y esporulación en los tratamientos provenientes de suelo de terraza alta y suelo disturbado y efecto significativo en el rendimiento del kudzú (P≤0,001) respecto a los demás tratamientos. Las esporas de suelos disturbados y no disturbados por minería de aluvión en el Bajo Cauca antioqueño (Colombia) mostraron baja capacidad infectiva; sin embargo, en cultivos trampa fue posible multiplicar HMA que produjeron esporas de cuatro morfotipos diferentes, uno de los cuales se identificó como G. microagregatum. El polimorfismo de los morfotipos obtenidos mediante la técnica de RAPD's permitió diferenciarlos con el cebador OPA2 y el agrupamiento por UPGMA con todos los cebadores mostró similitud mayor al 38% entre ellos. Los resultados moleculares y morfológicos, permitieron ubicar los cuatro morfotipos en el género Glomus pero posiblemente pertenecen a especies diferentes. Los resultados obtenidos son promisorios en la diferenciación de cepas nativas con bajo número de esporas colectadas a partir de muestras de suelos en proceso de rehabilitación, de los cuales no se conoce su composición de HMA.

Autor: Hazbón,Manzour Hernando

Tuberculosis (TB) remains the main infectious cause of deaths in the world. Due to the slow metabolism of the causative agent, Mycobacterium tuberculosis, the isolation, identification and drug susceptibility testing requires several weeks. New techniques have improved specificity, turnaround time and cost effectiveness. Although these methods yield results within hours from sample collection, the clinical significance of each positive result requires rigorous evaluation in most cases. Herein the advantages and disadvantages of the most promising molecular techniques for detection of TB and drug resistance are discussed.

Autor: Añez-Rojas,Néstor

Se detecta la presencia de Anaplasma marginale en becerros hijos de vacas con infección asintomática. Ensayos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) llevados a cabo en muestras de sangre de 31 vacas lactantes, en aparente buen estado físico y sus respectivas crías, revelaron la presencia de ADN específico de A. marginale en el 70 y 40%, respectivamente. La detección de parte del genoma de A. marginale en becerros recién nacidos, hijos de vacas asintomáticas PCR positivas, sugiere la transmisión de la infección madre-hijo por vía transplacentaria. Se discute las implicaciones epizootiológicas de la infección por A. marginale en animales asintomáticos y se advierte sobre la potencialidad de esta forma de transmisión en el mantenimiento del ciclo de este organismo. Se concluye que la transmisión por vía transplacentaria podría ser un evento de frecuente ocurrencia en el área de estudio y se sugiere la utilización de técnicas producto de la nueva biotecnología como la PCR para incrementar la especificidad en el diagnóstico